PCR, utawa reaksi rantai polimerase, yaiku teknik sing digunakake kanggo nggedhekake urutan DNA.Iki pisanan dikembangake ing taun 1980-an dening Kary Mullis, sing dianugerahi Bebungah Nobel Kimia ing taun 1993 kanggo karyane.PCR wis ngrevolusi biologi molekuler, supaya peneliti bisa nggedhekake DNA saka conto cilik lan sinau kanthi rinci.
PCR minangka proses telung langkah sing ditindakake ing siklus termal, mesin sing bisa ngganti suhu campuran reaksi kanthi cepet.Telung langkah kasebut yaiku denaturasi, anil, lan ekstensi.
Ing langkah pisanan, denaturasi, DNA untai ganda dipanasake nganti temperatur dhuwur (biasane watara 95°C) kanggo medhot ikatan hidrogen sing nahan untaian loro mau.Iki nyebabake rong molekul DNA untai tunggal.
Ing langkah kapindho, anil, suhu diturunake nganti watara 55 ° C kanggo ngidini primer bisa anil menyang urutan pelengkap ing DNA untai tunggal.Primer minangka potongan DNA cendhak sing dirancang kanggo cocog karo urutan kapentingan ing DNA target.
Ing langkah katelu, extension, suhu diunggahake nganti watara 72 ° C kanggo ngidini Taq polymerase (jinis DNA polimerase) kanggo sintesis untaian DNA anyar saka primer.Taq polymerase asalé saka bakteri sing urip ing sumber panas lan bisa nahan suhu dhuwur sing digunakake ing PCR.
Sawise siji siklus PCR, asile yaiku rong salinan urutan DNA target.Kanthi mbaleni telung langkah kanggo sawetara siklus (biasane 30-40), jumlah salinan urutan DNA target bisa ditambah kanthi eksponensial.Iki tegese sanajan jumlah cilik saka wiwitan DNA bisa digedhekake kanggo ngasilake mayuta-yuta utawa malah milyaran salinan.
PCR nduweni akeh aplikasi ing riset lan diagnostik.Digunakake ing genetika kanggo nyinaoni fungsi gen lan mutasi, ing forensik kanggo nganalisa bukti DNA, ing diagnosis penyakit infèksius kanggo ndeteksi anané patogen, lan ing diagnosis prenatal kanggo nampilake kelainan genetik ing janin.
PCR uga wis diadaptasi kanggo digunakake ing sawetara variasi, kayata PCR kuantitatif (qPCR), sing ngidini jumlah DNA diukur lan transkripsi mundur PCR (RT-PCR), sing bisa digunakake kanggo nggedhekake urutan RNA.
Sanajan akeh aplikasi, PCR duwe watesan.Sampeyan mbutuhake kawruh babagan urutan target lan desain primer sing cocog, lan bisa uga rawan kesalahan yen kahanan reaksi ora dioptimalake kanthi bener.Nanging, kanthi desain lan eksekusi eksperimen sing ati-ati, PCR tetep dadi salah sawijining alat sing paling kuat ing biologi molekuler.
Wektu kirim: Feb-22-2023